葉酸片的副作用很小，偶有胃腸道刺激癥狀，如惡心、嘔吐、上腹疼痛、便秘等，在大劑量服用時可出現黃色尿液。
葉酸在常規劑量服用時，一般不會出現不良反應，只有大劑量服用時，可出現胃腸道相關不良反應。因為葉酸是一種水溶性的維生素，超過人體需要的葉酸會隨著尿液排出體外，一般對身體不會產生影響。服用過量時可多飲水，促進葉酸的排泄。
出現葉酸服用后過敏情況的，應及時停用。未確診的疑似巨幼紅細胞性貧血患者，需慎用葉酸片，因為維生素B12缺乏時，如單純地補充葉酸片，會加重維生素B12的負擔和神經系統癥狀。
建議患者在醫生的指導下服用規定劑量的葉酸片，不可盲目服用。
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