骨髓穿刺術大致包括選取體位、穿刺部位、戴手套、穿刺、抽吸骨髓液、敷料固定、清理用品等步驟。
1.選取合適體位。胸骨及髂前上棘穿刺時取仰臥位，前者還需用枕頭墊于背后，以使胸部稍突出。髂后上棘穿刺時應取側臥位。腰椎棘突穿刺時取坐位或側臥位。
2.選擇穿刺部位。常取髂前上棘或髂后上棘為穿刺點，少數情況下選胸骨柄、腰椎棘突及脛骨。做好穿刺點標記。
3.戴手套，穿刺點局部消毒，鋪無菌洞巾，用2%利多卡因局部麻醉。
4.用左手拇指、食指固定穿刺部位，右手持針垂直骨面進行穿刺，當感覺接觸到骨皮質時，則左右旋轉，緩慢鉆刺骨皮質。進入骨髓質，且穿刺針已固定在骨內時，表示已進入骨髓腔。
5.拔出針芯，接上注射器，緩慢抽吸骨髓液。將骨髓液滴于玻片上，迅速涂片5～6張送檢。
6.抽吸完畢，插入針芯，拔出穿刺針，紗布覆蓋穿刺點，妥善固定，并壓迫穿刺點止血10～15分鐘。取末梢血推2張血片。
7.清理穿刺使用物品，觀察患者情況，囑患者傷口3天不要沾水，有不適隨診。
骨髓穿刺術為有創操作，需在操作前向患者交代骨穿的必要性及可能出現的問題，征求患者同意，并簽署知情同意書。用藥在醫師指導下進行。